黃曲霉毒素B1免疫親和柱
簡(jiǎn)要描述:黃曲霉毒素B1免疫親和柱親和柱凈化食品和飼料樣品中的黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2,凈化后的樣品可用 HPLC(高效液相色譜法)的測試。檢測靈敏度:黃曲霉毒素B1和G1能夠達到0.1-0.5ppb,黃曲霉毒素B2和G2能夠達到0.5ppb回收率:當樣品中的黃曲霉毒素含量在測量范圍內時(shí):黃曲霉毒素B1:1ppb添加回收率≥90%±5
產(chǎn)品型號: IAC-006
所屬分類(lèi):黃曲霉毒素免疫親合柱
更新時(shí)間:2023-12-15
廠(chǎng)商性質(zhì):生產(chǎn)廠(chǎng)家
詳情介紹
百奧思科黃曲霉毒素B1免疫親和柱操作說(shuō)明書(shū)
【概要】
黃曲霉毒素(AFT)是一類(lèi)化學(xué)結構類(lèi)似的化合物,均為二氫呋喃香豆素的衍生物。黃曲霉毒素是主要由黃曲霉 (aspergillus flavus)寄生曲霉 (a.parasiticus)產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物,在濕熱地區食品和飼料中出現黃曲霉毒素的機率最高。黃曲霉毒素被世界衛生組織(WHO)的癌癥研究機構劃定為1類(lèi)致癌物,是一種毒性*的劇毒物質(zhì).黃曲霉毒素的危害性在于對人及動(dòng)物肝臟組織有破壞作用,嚴重時(shí)可導致肝癌甚至死亡。在天然污染的食品中以黃曲霉毒素B1最為多見(jiàn),其毒性和致癌性也*。B1是最危險的致癌物,經(jīng)常在玉米,花生,棉花種子,一些干果中常能檢測到。它們在紫外線(xiàn)照射下能產(chǎn)生熒光,根據熒光顏色不同,將其分為B族和G族兩大類(lèi)及其衍生物。AFT已發(fā)現20余種。AFT主要污染糧油食品、動(dòng)植物食品等;如花生、玉米,大米、小麥、豆類(lèi)、堅果類(lèi)、肉類(lèi)、乳及乳制品、水產(chǎn)品等均有黃曲霉毒素污染。世界各國對食品,飼料中的黃曲霉毒素都有嚴格的*。
【適用范圍及性能】
本公司真菌毒素免疫柱系列產(chǎn)品測試形式是一個(gè)高性能的免疫親和柱,設計用于在進(jìn)行 HPLC(高效液相色譜法)、GC-MS(氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián) 用 儀)、ELISA(酶聯(lián)免疫吸附劑測定)之前清理(凈化)或 濃縮樣本。
用于定性、定量檢測谷物、副食品、酒類(lèi)等食品和飼料等樣本中的黃曲霉毒素B1時(shí)的樣品前處理。
柱容量:≥200ng
回收率:≥90%
3mL柱管/支
【試驗原理】
本產(chǎn)品的測定的基礎是抗原抗體反應,黃曲霉毒素B1單克隆抗體連接在柱內凝膠上,樣品中的黃曲霉毒素B1經(jīng)過(guò)提取、過(guò)濾、稀釋?zhuān)缓髮悠诽崛∫壕徛耐ㄟ^(guò)黃曲霉毒素B1免疫親和層析柱,在免疫親和柱內,毒素與抗體結合,之后洗滌免疫親和柱除去沒(méi)有被結合的其他物質(zhì)。用甲醇洗脫黃曲霉毒素B1,最后進(jìn)行相關(guān)分析。
【包裝組成】
黃曲霉毒素B1標準品(選配)
25支/盒,3mL柱管/支
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份
【需要而未提供的設備及試劑】
設備:
----高速均質(zhì)器或組織勻漿機
----粉碎機
----200ml/50ml量筒
----天平:感量0.1g
----微量移液器:?jiǎn)蔚?100ml~1000ml
----槽紋濾紙(折疊快速定性或定量濾紙)
----玻璃微纖維濾紙(1.5mm孔徑)
----50ml漏斗
----一次性玻璃試管
----泵流操作架(包括空氣泵,不同容積的玻璃注射器等)
試劑:
----甲醇(色譜級)
----蒸餾水或去離子水
----pH7.0磷酸鹽緩沖溶液(PBS):稱(chēng)取8.0g氯化鈉,1.2g磷酸氫二鈉,0.2g磷酸二氫鉀,0.2g氯化鉀,用990mL純水溶解,然后用濃鹽酸調節pH值至7.0,最后用純水稀釋至1000mL
----吐溫-20/PBS溶液(0.1%):取1mL吐溫-20,加入PBS緩沖溶液并定容至1000mL
【試劑配制】
樣品提取液:根據不同的樣品配置不同濃度的甲醇水溶液,作為樣品提取液。
【樣本處理步驟】
(一)花生,玉米,大米,小麥及其制品,植物油脂和飼料
----取25g粉碎的樣品(植物油脂直接取樣,無(wú)需處理)與125mL甲醇-水(7:3)溶液混合;
----加入5.0g氯化鈉以均質(zhì)器高速攪拌,提取2分鐘;
----4000r/min離心5min或用槽紋濾紙過(guò)濾;
----取15mL濾液并加入30mL水稀釋?zhuān)貌A⒗w維濾紙過(guò)濾,取稀釋后液體待測;
----將免疫親和柱連接于20.0mL玻璃注射器下。準確移取15.0mL樣品提取液注入玻璃注射器;
----將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調節壓力使溶液以約6mL/min流速緩慢通過(guò)免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過(guò)柱體;
----以10.0mL水淋洗柱子2次,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過(guò)柱體;
----準確加入1.0mL色譜級甲醇洗脫,流速為1 mL/min ~2mL/min,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。
(二)醬油
----取50g試樣與100mL甲醇-水(8:2)溶液混合;
----加入2.5g氯化鈉以均質(zhì)器高速攪拌,提取1分鐘;
----4000r/min離心5min或用槽紋濾紙過(guò)濾;
----取10mL濾液并加入40mL水稀釋?zhuān)貌A⒗w維濾紙過(guò)濾
----取稀釋后液體待測;
----將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準確移取10.0mL樣品提取液注入玻璃注射器;
----將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調節壓力使溶液以約6mL/min流速緩慢通過(guò)免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過(guò)柱體;
----用10.0mL 0.1%的吐溫/PBS清洗,再以10.0mL水淋洗柱子2次,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過(guò)柱體;
----準確加入1.0mL色譜級甲醇洗脫,流速為1 mL/min ~2mL/min,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。
(三)食醋
----取5g試樣,加入1.0g氯化鈉;
----以pH7.0磷酸鹽緩沖溶液稀釋定容至25.0mL;
----4000r/min離心5min或用槽紋濾紙過(guò)濾;
----取10mL濾液并加入10mL水稀釋?zhuān)貌A⒗w維濾紙過(guò)濾
----取稀釋后液體待測。
----將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準確移取10.0mL樣品提取液注入玻璃注射器;
----將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調節壓力使溶液以約6mL/min流速緩慢通過(guò)免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過(guò)柱體;
----用10.0mL 0.1%的吐溫/PBS清洗,再以10.0mL水淋洗柱子2次,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過(guò)柱體;
----準確加入1.0mL色譜級甲醇洗脫,流速為1 mL/min ~2mL/min,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。
【結果判定】
經(jīng)免疫親和柱凈化后,收集到的甲醇洗脫液可直接使用熒光計或者HPLC檢測,也可使用薄層色譜或者酶聯(lián)免疫試劑盒進(jìn)行檢測。收集到的1mL洗脫液中的黃曲霉毒素B1含量相當于1g樣品中黃曲霉毒素B1含量。
【注意事項】
----黃曲霉毒素危害極大,應戴手套操作。
----使用過(guò)的玻璃容器及黃曲霉毒素溶液最好用5%濃度次氯酸鈉溶液浸泡過(guò)夜。
----不要使用過(guò)了有效日期的免疫親和柱。
【貯藏條件及保存期】
貯藏條件:親和柱2-8℃常溫保存,不可凍存
保存期:該產(chǎn)品有效期為12個(gè)月。
【參考標準】
GB/T 18979-2003
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